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中文名稱：MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒

英(ying)文名稱：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit

產品規格：500次
產品貨號(hao)：LZ-01X6321

發貨周期：1～3天

商品介紹：

實驗報告：

一、分離與培養：

    1、無菌條件(jian)下，取出(chu)1-3d 齡SD大鼠心房組(zu)織(zhi)，然后用(yong)PBS將此組(zu)織(zhi)塊清洗(xi)2次，最后將組(zu)織(zhi)剪成1mm3左右大小；

    2、往組織塊中加入4 mL酶(mei)消(xiao)化(hua)液（0.1% 和0.1% I型膠原酶(mei)），混(hun)懸(xuan)10s，置(zhi)37℃條件下消(xiao)化(hua)10min，之后用(yong)滴管吹打制成單(dan)細胞懸(xuan)液，自然沉(chen)淀并(bing)收集上清(qing)，用(yong)含10% FBS培(pei)養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)后4℃放(fang)置(zhi)；

    3、剩下的組(zu)織再加入3～4mL酶消(xiao)化(hua)液，混懸10s，置(zhi)37℃消(xiao)化(hua)10 min后，按(an)上述方法收(shou)集上清并終止消(xiao)化(hua)后4℃放置(zhi)，重復此步驟2-3次，直至(zhi)組(zu)織*被消(xiao)化(hua)；

    4、用200目不(bu)銹鋼篩網過濾(lv)細胞消化液，1200r/min 離(li)心10min，棄去上(shang)清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸(xuan)，接種于25cm2培養瓶，放置(zhi)于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

    5、差速貼(tie)壁1h后，吸出培養基，按實(shi)驗需要接種(zhong)于(yu)6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

    1、待(dai)心(xin)房肌細(xi)胞(bao)生長至80%融(rong)合時(shi)，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細(xi)胞(bao)2次，每次10min，然(ran)后(hou)用4%多聚甲醛在室溫條(tiao)件(jian)下固(gu)定細(xi)胞(bao)15min；

    2、PBS沖洗細胞2次(ci)，每次(ci)10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

    3、PBS沖洗細(xi)胞2次(ci)，每次(ci)10min，然后在室溫(wen)條件下，用4% BSA封閉細(xi)胞30min；

    4、按(an)1: 100的比(bi)例稀釋(shi)α-actin一抗，然(ran)后將(jiang)其放在4℃冰(bing)箱中(zhong)孵育細胞過(guo)夜；

    5、PBS沖洗(xi)細胞3次(ci)，每(mei)次(ci)10min，按1：150的比例稀(xi)釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放(fang)置1h；

    6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養操作步驟：

1．用(yong)蓋片鑷將蓋玻(bo)片自75%乙(yi)醇中(zhong)取(qu)出，用(yong)無菌絲(si)綢布擦(ca)拭干凈，不要用(yong)紗布； 

2．將蓋(gai)玻片(pian)輕(qing)輕(qing)放入6孔(kong)培養板（每(mei)孔(kong)一片(pian)）或培養皿(min)中（每(mei)個平皿(min)可放置(zhi)2-3片(pian)）； 

3．在(zai)距離紫(zi)外燈直射范圍(wei)內20-30 厘米(mi)處照射2-3小時； 

4．將經過計數的細胞懸(xuan)浮液移入培(pei)養(yang)板中(zhong)，使(shi)蓋玻片*浸在培(pei)養(yang)液中(zhong)； 

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 

人Ⅲ型(xing)膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人Ⅲ型前膠原(yuan)肽(PⅢNP)ELISA試劑(ji)盒    人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人(ren)Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑(ji)盒    人(ren)ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人BH3結構域(yu)凋亡誘(you)導蛋白(bai)(Bid)ELISA試(shi)劑盒    人ELISA試(shi)劑盒    96T/48T    

人(ren)B細胞κ 輕肽基因(yin)增強(qiang)子核因(yin)子抑制因(yin)子ε(Nfkbie)ELISA試(shi)劑盒(he)      人(ren)ELISA試(shi)劑盒(he)    96T/48T    

人(ren)B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒      人(ren)ELISA試劑盒    96T/48T    

人(ren)B細胞活(huo)化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑(ji)盒      人(ren)ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人(ren)B細(xi)胞連接蛋白(bai)(BLNK)ELISA試(shi)劑盒    人(ren)ELISA試(shi)劑盒    96T/48T    

人(ren)B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試(shi)劑盒(he)    人(ren)ELISA試(shi)劑盒(he)    96T/48T    

人B細(xi)胞淋(lin)巴瘤(liu)因子3(Bcl3)ELISA試劑盒  ;  人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細胞生長(chang)因子(BCGF)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T    

人B細(xi)胞受體(BCR)ELISA試劑盒(he)    人ELISA試劑盒(he)    96T/48T    

人(ren)(ren)B因子(BF)ELISA試(shi)劑盒    人(ren)(ren)ELISA試(shi)劑盒    96T/48T    

人(ren)C4結合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒(he)    人(ren)ELISA試劑盒(he)    96T/48T    

人cAMP反應元件結合(he)蛋白(CREB)ELISA試劑(ji)盒    人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人CCAAT增強(qiang)子結合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑(ji)盒    人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    ;

人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

人(ren)CCAAT增強子結合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒(he)    人(ren)ELISA試劑盒(he)    96T/48T    

人CC趨(qu)化(hua)因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T    

一步法TUNEL細(xi)胞凋亡檢測(ce)試劑盒(he)(紅色熒光)    

TUNEL細胞(bao)凋亡檢測試(shi)劑(ji)盒(he)(顯色法)    

Caspase 1 活性(xing)檢測(ce)試劑盒    

Caspase 2 活性檢(jian)測試(shi)劑盒    

Caspase 3 活性(xing)檢測試劑(ji)盒    

Caspase 4 活(huo)性檢(jian)測試劑盒    

Caspase 6 活性(xing)檢測試劑盒    

Caspase 8 活性檢(jian)測(ce)試劑盒    

Caspase 9 活(huo)性檢測試劑(ji)盒    

Caspase抑(yi)制劑(Z-VAD-FMK)    

Caspase 3抑制劑(Ac-DEVD-CHO)    

線粒體膜(mo)電位檢測試劑盒    

羅丹明123    

CFDA SE細胞增殖與(yu)示蹤檢測試(shi)劑盒    

細(xi)胞(bao)增殖示(shi)蹤熒(ying)光(guang)探(tan)針(CFDA SE)    

Ad-GFP-LC3B    

Ad-mCherry-GFP-LC3B    

DAPI溶(rong)液(5mg/ml)    

DAPI染(ran)色液    

Hoechst 33258細胞(bao)藍色熒光染(ran)料    

MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒Hoechst 33258染色液    

Hoechst 33342細胞(bao)藍(lan)色熒光染(ran)料    

Hoechst 33342染色(se)液(ye)    

活細(xi)胞染色液(ye)(Hoechst 33342)(100×)    

注意事項：

1、本試劑(ji)盒僅供科學(xue)研究使用(yong)，不可用(yong)于診斷或治療。

2、螺(luo)旋蓋(gai)(gai)微(wei)量試劑管(guan)裝的試劑在(zai)開蓋(gai)(gai)前請短(duan)暫離(li)心，將蓋(gai)(gai)和(he)管(guan)內(nei)壁上的液體(ti)離(li)心至管(guan)底，避免開蓋(gai)(gai)時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑(ji)混用，否(fou)則會(hui)影響使用效果(guo)。

4、樣品或(huo)(huo)試劑(ji)(ji)被細菌(jun)或(huo)(huo)真菌(jun)污(wu)染或(huo)(huo)試劑(ji)(ji)交叉污(wu)染可能(neng)會(hui)導致錯誤的結果。

5、最好使(shi)用(yong)一(yi)次性吸頭、管、瓶或玻璃(li)器皿，可重復(fu)使(shi)用(yong)的玻璃(li)器皿必須在使(shi)用(yong)前清(qing)洗并*清(qing)除殘留清(qing)潔(jie)劑。

6、避免皮膚(fu)或粘膜與試劑接(jie)觸。

7、需長時間保(bao)存(cun)可-20℃避(bi)光(guang)(guang)保(bao)存(cun)。避(bi)免(mian)反復凍融(rong)，否則將會(hui)增加(jia)空白吸收，從而(er)影(ying)響檢測結果。最好小劑(ji)量分裝，用(yong)避(bi)光(guang)(guang)袋或是黑紙、錫箔(bo)紙包住避(bi)光(guang)(guang)。

8、用(yong)培(pei)養(yang)基或 PBS 來配制(zhi)待(dai)(dai)檢測(ce)藥物。如(ru)果(guo)待(dai)(dai)測(ce)藥物有(you)還(huan)原性，則(ze)測(ce)定不(bu)含(han)細胞，僅含(han)有(you) MTS 的待(dai)(dai)測(ce)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光(guang)度。如(ru)果(guo)該吸光(guang)度很小，則(ze)可以直接加(jia)入 MTS ，如(ru)果(guo)吸光(guang)度相對較大，則(ze)需要除去(qu)培(pei)養(yang)基，并用(yong)新鮮培(pei)養(yang)基洗滌細胞兩次，然后加(jia)入新的 100 μl 培(pei)養(yang)基和 10 μl MTS 進行檢測(ce)。

9、細胞處理(li)需要小心操作,盡量避(bi)免人為(wei)的損傷細胞。

10、加(jia) MTS 溶液后孵(fu)育時(shi)間的(de)長(chang)短根據細(xi)胞的(de)類型(xing)和細(xi)胞的(de)密度(du)等實驗情況而定，對于大(da)多數情況孵(fu)育 1 小時(shi)即可，白(bai)細(xi)胞需要(yao)培養較長(chang)時(shi)間。

11、如(ru)果不是使用(yong) 96 孔板檢測，MTS 溶液的用(yong)量相(xiang)應(ying)等(deng)比例增(zeng)加(jia)即可(ke)。